考马斯亮蓝法测蛋白浓度

考马斯亮蓝法测蛋白浓度细胞蛋白提取：往15ml离心管内加入1m1细胞裂解液，充分混旋溶解后，转移至1.5mlEP管→12000rpm,3加in离心，每组各取上清液300ul于EP管中，待用。（注意：不要取到沉淀；离心机用前样品需要配平，启动前需盖上盖子)。蛋白质浓度测定：每组取上清液20μ1于EP管中，加生理盐水780μ1（稀释40倍），考马斯亮蓝法测定蛋白质含量。（注意：每组将剩余上清液交给老师，保存于20℃，用于下次SDS-PAG迅电泳及WB实验。)考马斯亮蓝法测定蛋白质含量：取六个10cm的玻璃试管，用记号笔在每个管上做好标记，按照下表所示，加入相应的试剂：试剂标准管1标准管2标淮管3标准管4空白管测定管蛋白含量25012562.531.250未知(μg/ml)标准/稀释样品(ml)0.10.10.10.10.1生理盐水(ml)0.1考马斯亮蓝3.03.03.03.03.03.0染液(ml)