Bio-Rad-荧光定量-PCR-仪操作流程

Bio-Rad荧光定量PCR仪操作流程1、仪器开启顺序：电脑-仪器-软件。2、点击“User-de fined”编辑程序(protocol)及板型(plate)3、程序(protocol)中选择“Create New..”编辑程序：sample volume中填写反应体系体积，程序反应温度，时间，循环数等数值可直接在曲线图或下方程序列表中更改。如需插入溶解曲线，选中程序列表中“G0TO”这一步后，点击左方“Insert Melt Curve”添加即可（即插入到PCR结束后进行溶解曲线分析），点击“OK”保存后继续。4、点右下角“Next”至板型(plate)编辑界面，选择“Create New.”编辑：“ScanMode”选择“All Channels”多通道模式扫描。在“Select Fluorophores.”中勾选实验涉及的荧光，点击“OK”保存。选择让有管子的孔，右侧“sample type”选择“unknown”,在下一项中将Load下方每孔对应的荧光选中打上勾，点击“OK”保存后继续。如只用到SYBR或FAM两种荧光，“Scan Mode”选择“SYBR/FAMoly”单通道模式可节省扫描时间，其他操作同上。5、点右下角“Next”至“start run”界面，核对程序无误后，放入样品，关上仪器盖子(closed lid按钮)，点击“start run”按钮后保存结果文件后即可运行。6、PCR结束后，打开仪器盖子(open lid按钮)，取出样品管，关上仪器盖子。7、仪器关闭顺序：软件-仪器-电脑。注意事项：1、开关仪器盖子时，请勿因仪器自身开关时间较长而强制拍起或按压盖子，以免仪器不能正常运行2、确保PC℉管子盖严实，以免仪器升温过程中泄漏，如有泄漏，可章75%酒精或84消毒液擦拭污染处3、使用结束后请勿将样品遗留在仪器内部宝城生物