WST67-1996全血胆碱酯酶活性的分光光度测定方法硫代乙酰胆碱-联硫代双硝基苯甲酸法

中华人民共和国卫生行业标准全血胆碱酯酶活性的分光光度测定方法硫代乙酰胆碱-联疏代双硝基苯甲酸法Ws/T67-1996Blood-Determination of cholinesterase activity-Spectrophotometric method-Acetylthiocholine anddithio-bis-(nitrobenzoic acid)method1主题内容与适用范围本标准规定了血中胆碱酯酶活性的分光光度测定方法一硫代乙酰胆碱-联硫代双硝基苯甲酸法。本法最低检测浓度为2单位/1mL血。本标准适用于正常人和接触有机磷类及氨基甲酸酯类农药者血中胆碱酯酶活性的测定2原理胆碱酯酶水解硫代乙酰胆碱(ASCh,Acetylthiocholine)生成硫代胆碱和乙酸。硫代胆碱与巯基显色剂5,5'-联硫代-双-2-硝基苯甲酸(DTNB,Dithio-bis-nitrobenzoic acid)反应形成黄色化合物5-巯基-2硝基苯甲酸(TNB)。在波长412nm处比色定量。3仪器系列生产厂家3.1分光光度计，5mm比色杯。3.2恒温水浴。WWW.nacylab.com TEL:400-616-46863.3离心机。3.4血红蛋白吸管，20L。3.5刻度吸管0.5mL,2.0mL。3.6试管10mL。3.7容量瓶10mL3.81/10万天平。4试剂本标准所用试剂除另有说明外，均为分析纯试剂。4.1实验用水：蒸馏水或具有同等纯度的去离子水。4.2磷酸盐缓冲液(1/15mmol/L,pH7.40):称取9.07g无水磷酸二氢钾(KHPO,),用水溶解并稀释至1000mL(甲液)：称取23.87g磷酸氢二钠(Na:HPO,·12H,O),用水溶解并稀释至1000mL(乙液)。取甲液19.2mL与乙液80.8mL混合即得。4.3生理盐水：氯化钠8.5g/L。4.4硫代乙酰胆碱(ASCh):称取72.3 mg ASCh(生物试剂)溶于生理盐水中，并稀释到10mL:置冰箱中保存，临用时以生理盐水稀释10倍。中华人民共和国卫生部1996-10-14批准1997-05-01实施