IVISSpectrum小动物活体成像系统简明操作规程

IVIS Spectrum小动物活体成像系统简明操作规程IVIS系统开机1.启动计算机和机器电源：2.点击Living Imaging软件启动程序，并点击nitialize初始化IVIS系统：3.初始化时，IVIS Acquisition Control Panel中的温度状态灯为红色，当温度状态灯绿色时可进行成像。Living Imaging软件操作步骤生物发光和荧光二维成像步骤：1.将麻醉的小鼠放入成像箱并关门。2.IVIS Acquisition Control Paneli选择成像模式：Luminescent(生物发光)或Fluorescent(荧光)3.选择曝光参数，默认值为Auto(也可手动调节成像参数，包括Exposure Timel曝光时间，Binning,f'stop光圈)。4.勾选Photography,Overlay和Alignment Grid选项。5.选择成像视野大小：A适用于小鼠局部成像，D可同时成像5只小鼠。6.选择小鼠成像高度(Subject height)为l.50cm.7.选择激发(Excitation Filter)和发射(Emission Filter)滤光片8.注：生物发光成像Excitation Filter选择Block,Emission Filter选择Open。9.点击Acquire按钮获取成像图片。l0.获取图片后，点击Tool Palette中的ROI Tools,选取Circle,Square,Free Draw或Gnid进行ROI圈选11.点击Measure ROIs,获取ROI区域的定量数值荧光光谱分离步骤(Automatic):l.IVIS Acquisition Control Panel.点击Imaging Wizard,并选择Fluorescence。2.Fluorescence-Spec Unmix/.Filter Scan选择探针类型，并选择波长扫描方式和成像物体Imaging Subject)3.点击Acquire Sequence获取序列图像。4.Tool Palette选择Automatic,并点击Start Unmixing。5.选择需要光谱分离的成分，点击Finish,获取光谱分离成像结果。生物发光三维重构成像：l.IVIS Acquisition Control Panel点击maging Wizard,.并选择Bioluminescence2.Imaging Wizard-Bioluminescence选择DLT,点击Next,选择生物发光类型和成像物体(Imaging Subject)3.点击Acquire Sequence获取序列图像.4.获得序列图像后，Tool Palette点击Surface Topography,选择小鼠成像姿势(Orientation)和物体类型(Subject),并点击Generate Surface。5.Single View Surface Topography Analysis获取表面拓扑区域，并点击Finish,获得小鼠表面拓扑成像图像。6.Tool Palette点击DLIT3 D Reconstruction,Analyze选择拓扑成像所需滤光片，Properties选择光源类型(Source Spectrum),并点击Start,并接下来点击Reconstruct?获取生物发