Stillanaica®数字PCR系统操作流程

Stilla naica®数字PCR系统操作流程一、实验准备1.使用配套的微流控芯片如Sapphire芯片，支持1-12样本/次；或Opal芯片，支持148样本/次。2.准备PCR反应预混液(含引物、探针、酶、NTPs等)，需根据实验设计优化浓度（如引物/探针浓度建议0.125-1M)。3.混合与离心：将上述试剂加入到离心管中。涡旋混匀后瞬时离心，将所有试剂离心到管底。二、加样1.打开芯片：打开Sapphire芯片的白色盖子，任意方向旋转l4圈即可打开，丢弃盖子。2.加样操作：移取25uL混合好的PCR反应液，加入到Sapphire芯片的孔井中，注意不要与内置油相接触。3.封闭芯片：使用专用PCR盖封闭孔井。4.芯片转移：将封闭好的芯片转移到Naica Geode微滴生成和扩增系统中。三、微滴生成和PCR扩增1.系统准备：打开Naica Geode系统，调节气压到1,250+/-50mbar。2.芯片放置：打开机器盖，将芯片垂直放置于加热模块上，关闭机器盖并确保密封。3.程序选择与启动在主幕菜单中选择Run”,然后Open”,在“scripts'”或templates'”下拉菜单中选择应用程序点击Open”(默认的PCR和RT-PCR程序在“templates''中)。也可以编辑程序参数后启动。4.监控与结束：