WatersHclass操作规程

Waters H class操作规程一.准备1、配制样品和标准品溶液，并放入样品盘。注：样品瓶内溶液一般1/33/4之间。2、根据待测样品的需要更换合适的色谱柱。注：①色谱柱方向与流动相流动方向一致。②立式柱温箱中色谱柱及流动相方向应“下进上出”，防止断流。3、准备流动相及清洗液：流动相用合适的0.45um滤膜过滤，并“真空-超声”脱气23min。注：①水相用水膜滤过，有机相用有机膜滤过。②使用UPLC柱时，流动相用0.22um滤膜滤过。③MS(清洗灌注密封圈)：常用5%10%甲醇或乙腈。W%sh(强洗，针外壁)：常用50%以上的甲醇或乙腈。SM1(弱洗，注射器)：常用10%20%的甲醇或乙腈。4、检查仪器各部分的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。二.开机1、接通总电源。2、依次打开样品管理器(FIN)、四元溶剂管理器(QSM)的电源开关。3、待FIN、QSM自检完成，打开电脑。4、双击“ACQUIY UPLC”快捷键，打开控制台。5、灌注溶剂：QSM→【控制】→【灌注溶剂】→选择管路。6、清洗进样针及注射器：FIN→【控制】→【灌注】。7、清洗灌注密封圈：QSM→【控制】→【灌注密封圈清洗】。注：若管路干了，需用注射器抽取至液体流出。8、平衡色谱柱：QSM→【控制】→【设置流动相】→平衡约15min。注：一般用10%甲醇或乙睛。9、打开检测器电源开关，待检测器自检完成，一般需要30mi。注：若FIN、QsM和检测器“通讯失败”，则分别点击各自菜单：【控制】→【重设】。三.项目建立1、运行Empower3:软件，用户账号：system:密码：manager。2、点击【配置系统】，进入界面。3、新建项目：在界面中，右击→【新建】→【项目】。注：①表空间≥200MB,不启用备注设定。②源项目：一般选用“Defaulte”做模板。③父项目（存放位置）及名称按照“项目建立规范”建立。四.参数设置1、点击【运行样品】，选择合适的“系统”和“项目”。2、新建方法组及仪器方法：【编辑】菜单→【新建方法组】→启用“向导”→点击【新建】，进入“新建仪器方法”窗口→设置参数：FN(流动相及其比例，流速)，QSM(柱温)，检测器（波长）等→保存一关闭新建仪器方法窗口→在“新建方法组”窗口中选择“仪器方法”等→保存一→关闭窗口。注：①PDA的3D扫描波长范围190500.②梯度洗脱中“曲线”默认为6。并在梯度最后阶段回归初始比例。③使用己有仪器方法：在“仪器方法”小窗口中→直接在“下拉菜单”中选择已有的仪器方法。3、建立批处理表：设置样品板、位置、样品名称、进样数、类型、方法组、时间等。注：首先要选择“样品板类型”：AMS-48Wial2mlHolder.四.采集数据