戴安HPLC操作说明书手册

戴安HPLC标准操作规程(SOP)一、准备工作1、泵：A、流动相：①、流动相是否充足：（主要是有机相或者是单一通道的缓冲盐体系），一般应在所预计的消耗量之上加150ml,以保证仪器运行过程中不会出现流动相短缺：②、流动相是否新鲜：（主要是高纯水及缓冲盐流动相），一般情况下一次制得的纯水或缓冲盐流动相应在连续的24小时内使用完，如未使用完也应弃去不用，并重新配制新鲜的流动相。特殊情况至少应重新过滤并脱气。B、柱塞清洗液：清洗液是否新鲜及匹配：对于常规的流动相（一般指不含盐或离子对等添加剂的流动相)，配制50%甲醇作为清洗液，在连续不超过4天工作的情况下可以两周一换：若超过4天，则一周一换。对于含盐或其它添加剂的流动相，配制5%甲醇（或高纯水)作为清洗液，在连续使用时，应每日更换：中间如有较长时间不用，则应改为50%甲醇作为保存液，并在下次使用时，根据所使用的流动相配制适宜的清洗液。:若泵超过半个月以上不用，应将柱塞清洗溶剂管（蠕动泵下压部分）抽出，再下次使用时放回原位置，以保证清洗管道的正常使用。C、溶剂管道：①、管道中的气泡：在泵长期不用时，由于脱气机停止工作，流动相会重新溶剂环境中的气体，而产生的气泡会对柱、泵及检测器产生不同程度的影响，因此要求在停泵后重新使用时应先观察A、B、C、D四溶剂管道进比例阀部分是否存在气泡，如无，在泵启动后等待5分钟后（脱气机自动脱气），再启动泵流速：若有，则选择相应的通道（按泵面板上的相应字母并保持约3秒钟)，打开PURGE阀后，按面板上的PRGE键进行流动相自动脱气（可选择再次按键关闭，或等待5分钟后仪器自动停止），完成后先关闭PURGE阀，再启动泵流速。②、流动相快速替换：由于流动相通道有限，当在同一个通道中更换流动相时，应首先打开PURGE阀，再按泵面板上的PURGE键进行快速溶剂替换（流动为6ml/min,持续5分钟)，完成后再关闭PURGE阀，按要求进行系统的过渡或平衡。2、自动进样器：A、进样针排气：当自动进样器非连续使用时（间隔一天或以上）应在仪器启动前（尤其是泵)先进行进样针排气。打开Chromeleon主程序后，点出Files,选择Browser,打开后，点击Dionex Temp.,选择Panle中的Dionex LC,在右边的窗口中双击ASI100.pan文件打开后，点菜单Control拉至最低下点击，在Connect变绿后，选手Wash,settings更改Wash Volue为250、Dispense为50后，在R、B盘中放置甲醇，G盘中放置异丙醇，按Prie进行针排气，完成后即可。（对于面板中有设置的用户直接在自动进样器设置窗口中按针排气(Syringe Prime)即可。B、进样针清洗：当连续使用中需要更换样品类型或流动相粘度较大时，应在每次进样完成后进行针清洗。在Program编辑查看时，在结束时间命令前加WASH命令：如选择单瓶进样，则在进样完成后，按自动进样器选项中的Wsh键进行清洗。3、柱温箱：柱温箱应在打开电源且柱连接好后，及时设置为方法要求的温度。4、检测器：为减少灯能量浪费，检测器应在样品准备完成后或基本完成时，且仪器系统按要求流动相及流速平衡至少30分钟以上后打开，在完成自检20分钟以后方可开始样品的分析。二、仪器平衡：