流式细胞仪AccuriC6操作说明书手册

流式细胞仪Accuri C6一、启动Accuri C6仪器①依次开仪器电源、电脑显示器及主机电源②5~10分钟后，双击电脑桌面“CFlow Plus”图标，进入仪器控制软件界面。软件界面信号灯指示为黄色，显示仪器与电脑没有连接好：软件界面信号灯指示为绿色，显示仪器与电脑已连接好③检查仪器旁边四个液体容器，清空“Waste”桶中的废液，检查“Sheath”、“Cleanning fluid”、“Decontamination”三个桶中液体量是否满足实验要求，若存放时间超过1个月，则需要进行更换。其中“Sheath”为超纯去离子水，“Cleanning fluid”有效氯离子为1%的次氯酸钠，“Decontamination”为细菌消毒液，1295叫杀菌液原液用超纯水定容250ml④载物台上放置空管，点击软件界面Instrument/.Run backflush cycle,.可以看见少许液体从进样针中流出来，作用为反冲，清除进样针中的残留物⑤在软件96孔板界面中任选1孔，载物台上放置1管去离子水，⑥选择运行速度为“High”,运行时间设置为10分钟，点击“Run”按钮运行10分钟自动停止。该步骤的作用是：激光器预热，清晰管路⑦该孔收集数据后变为蓝色，鼠标选中该孔，点击“Delete Sample Data”,删除孔内数据，启动步骤完成，即可开始检测样品二、Accuri C6样品检测①将样品放置在载物台上，在软件96孔界面选择样品的位置，并命名②设置检测停止条件。(1)无限制检测Run unlimited,手动点击停止：(2)收集多少个细胞后停止，在events框中填写；(3)收集多长时间停止，在min和sec框中填写：(4)收集多少体积停止，在叫框中填写③在Fluidics框设定进样速度，可选择慢速、中速和快速，或者在Custom框中手动设置进样速度④“Set Threshold”设定阈值，需要根据实验设定合适的阈值，阈值设置太低，背景荧光对目标细胞的荧光信号产生较大的干扰，阈值设置太高，