潍坊医学院医学研究实验中心仪器简明操作规程汇编ABI7500FAST荧光定量PCR仪简明操作规程L.双击桌面图标,或从Start:>All Programs>Applied Biosystems>7500 Software>7500V2.0开启软件。进入主界面后选择Advanced Setup。2.默认进入Setup下的Experiment Properties界面2.1输入实验名称(Experiment Name)2.2确认仪器型号2.3在实验类型中,选择Quantitation-Comparative CT(△CT)2.4选择试剂种类2.5确认运行模式3.进入Setup下的Plate Setup界面,编辑基因(Target)及样本(Sample);3.l在“define targets and samples'”界面中设置基因3.2在“assign targets and samples”中进行样品板的排布。4.在“Select relative quantitation setting”中设置内参基因及对照样本。5.进入Run Method界面,设定反应条件及反应体积。6.点击“save”按钮,文件储存成Experiment Document Single Files(*.eds)格式,然后在Run界面按下按钮,反应即开始进行。7.实验结束后,点击界面右上角的Analyze按钮,软件将会显示实验结果:7.1在扩增图中(见上图),可通过更改Plot Settings来改变扩增图的显示方式。如果想查看阈值线或基线,请将Threshold及Baseline打勾。7.2查看相对表达量结果时,利用Plot Settings选项,可以以不同方式显示相对表达量的结果。7.3对于SYBR Green法实验,可以在Melt Curve界面中查看熔解曲线。7.4检测QC Summary结果,可以快速查看实验中是否有反应孔存在异常情况。黄色三角形中的数字1代表有一种异常情况,2代表有两种异常情况,以次类推。详细信息及解决方案可以在Flag
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